Título: Perfil dos sítios de rDNA 35S após o uso do inibidor transcricional Actinomicina D

Autoria de: Beatriz Panegassi de Souza

Orientação de: Laiane Corsini Rocha

Coorientação de: Vania Helena Techio

Presidente da banca: Laiane Corisini Rocha

Primeiro membro da banca: Vania Helena Techio

Segundo membro da banca: Marco Tulio Mendes Ferreira

Palavras-chaves: Gene ribossomal, sítios frágeis, organização nucleolar, gap, nucléolo

Data da defesa: 05/12/2019

Semestre letivo da defesa: 2019-2

Data da versão final: 15/12/2019

Data da publicação: 15/12/2019

Referência: Souza, B. P. d. Perfil dos sítios de rDNA 35S após o uso do inibidor transcricional Actinomicina D. 2019. 32 p. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas Bacharelado)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2019.

Resumo: No gênero Lolium, o número, distribuição e comportamento dos sítios rDNA 35S têm sido bastantes estudados. Os sítios de rDNA 35S de Lolium multiflorum Lam., apresentam ??gaps?? na cromatina dos cromossomos e em núcleos interfásicos e metáfases mitóticas, fato este que tem sido associado à expressão da fragilidade, denominados sítios frágeis (SF), relacionada à intensa atividade transcricional. A actinomicina D (ActD), um inibidor transcricional, permite manipular a expressão desses sítios de rDNA para melhor entender a biologia dessa região. Para avaliar os efeitos da inibição da transcrição com ActD sobre os sítios de rDNA 35S de L. multiflorum, utilizou-se a marcação dos sítios de rDNA 35S via Hibridização In Situ Fluorescente (FISH) e a coloração Ag-NOR para visualizar os nucléolos. Para isso, sementes dessa espécie foram previamente germinadas e tratadas com ActD nas concentrações de 15 e 30ugmL durante 48h. Parte do experimento foi mantido como controle negativo. Foram avaliadas metáfasesprometáfases quanto ao número de sítios rDNA 35S e quanto à presença de lesões (gapconstrição), também foram analisados os números de sinais 35S em núcleos interfásicos. Quanto aos nucléolos, contabilizou-se o número de nucléolos por núcleo e a proporção da área nucleolar em relação à área total do núcleo. O número de nucléolos não apresentou ampla diferença em relação ao tratamento controle. Já a porcentagem de área nucleolar foi afetada nas concentrações usadas, sendo aumentada quando dois nucléolos estavam presentes na concentração de 30 e diminuída quando havia três nucléolos, isso quando comparados a área de um e dois nucléolosnúcleo. Nos núcleos interfásicos, tanto o controle quanto a concentração de 15ugmL apresentaram maior número de sinais de rDNA 35S, mas esse aumento foi mais pronunciado na concentração de 30ugmL. Quanto aos sítios de rDNA 35S observados em prometáfasemetáfase, houve uma maior porcentagem de lesões (gaps e constrições) na concentração se 30ugmL, seguida pela concentração de 15ugmL e, por fim, pelo controle. O conjunto de resultados indicam que o tratamento com ActD promoveu alterações sutis em L. multiflorum, em relação à estudos anteriores realizados com outras espécies de gramíneas. Técnicas mais apuradas, como a PCR quantitativa, poderão trazer respostas mais concretas quanto ao nível de inibição transcricional causada pelas diferentes concentrações de ActD nos sítios de rDNA 35S de L. multiflorum.

URI: sip.prg.ufla.br/publico/trabalhos_conclusao_curso/acessar_tcc_por_curso/
ciencias_biologicas_bacharelado/20192201611077

URI alternaviva: repositorio.ufla.br/handle/1/44601

Curso: G012 - CIÊNCIAS BIOLÓGICAS (BACHARELADO)

Nome da editora: Universidade Federal de Lavras

Sigla da editora: UFLA

País da editora: Brasil

Gênero textual: Trabalho de Conclusão de Curso

Nome da língua do conteúdo: Português

Código da língua do conteúdo: por

Licença de acesso: Acesso aberto

Nome da licença: Licença do Repositório Institucional da Universidade Federal de Lavras

URI da licença: repositorio.ufla.br

Termos da licença: Acesso aos termos da licença em repositorio.ufla.br

Detentores dos direitos autorais: Beatriz Panegassi de Souza e Universidade Federal de Lavras

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